化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒是一種超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒，本產(chǎn)品與二抗上偶聯(lián)的辣根過(guò)氧化物酶(HRP)發(fā)生化學(xué)反應發(fā)出螢光，從而可以通過(guò)用X光片壓片或其它適當化學(xué)發(fā)光成像設備檢測樣品。
HRP(40 kDa)已成為化學(xué)發(fā)光蛋白質(zhì)印跡檢測的常規酶。其穩定性和較小的分子量使其應用逐漸普及，通過(guò)使每個(gè)IgG標記更多的分子，可實(shí)現更高的檢測靈敏度。此外，HRP化學(xué)發(fā)光底物的改良和發(fā)展使其相較AP底物具有更高的蛋白質(zhì)印跡檢測靈敏度。
用于辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的化學(xué)發(fā)光底物多為雙組分系統，由穩定的過(guò)氧化物溶液和增強型魯米諾溶液組成。
如果要制備工作液，需要將兩種組分混合在一起。當與結合有HRP標記抗體(或其他探針)的印跡一起孵育時(shí)，化學(xué)反應生成的發(fā)射光可在425nm下，通過(guò)X光膠片、CCD成像系統和用于檢測化學(xué)發(fā)光的磷光成像儀進(jìn)行采集。發(fā)射光僅在酶-底物反應期間發(fā)生;
因此，一旦酶周?chē)牡孜锖谋M，信號輸出將停止。雖然X-光膠片能夠提供定性和半定量的數據，并可以用來(lái)確認靶蛋白的存在，但冷CCD成像裝置能夠提供定性分析、即時(shí)圖像處理，具有更高靈敏度、更高分辨率和比膠片更大的動(dòng)態(tài)范圍等優(yōu)點(diǎn)。
化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒用于檢測直接或間接標記辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。本試劑盒優(yōu)化了底物組成，使用了新型高效增強劑，發(fā)光強度比傳統 ECL 顯色液提高了 50-100 倍，并有效地降低了背景。
試劑盒使用新的氧化劑代替不穩定的雙氧水，提高了試劑盒的穩定性。洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液，室溫孵育膜數分鐘，將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。
然后轉入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數秒到數小時(shí)，顯影定影后蛋白質(zhì)或核酸條帶可清晰顯示在X光膠片上。
本試劑采用了*的發(fā)光底物系統，化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒盒是目前靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑。