超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒免疫學(xué)分析
簡(jiǎn)要描述：
超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒免疫學(xué)分析（SuperSignal ECL Chemiluminescent Substrate Kit）是靈敏的、基于魯米諾的新一代增強型化學(xué)發(fā)光HRP底物，通過(guò)Western Blot能實(shí)現低皮克級的蛋白檢測。
產(chǎn)品時(shí)間：2024-03-12
打印當前頁(yè)SuperSignal ECL Chemiluminescent Substrate Kit
超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號 | 規格 | 價(jià)格（元） |
SuperSignal ECL Chemiluminescent Substrate Kit 超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒 | MM0711-100ML | 100ml | 288 |
MM0711-500ML | 500ml | 1158 | |
MM0711-1000ML | 2×500ml | 2258 |
產(chǎn)品描述
超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒（SuperSignal ECL Chemiluminescent Substrate Kit）是靈敏的、基于魯米諾的新一代增強型化學(xué)發(fā)光HRP底物，通過(guò)Western Blot能實(shí)現低皮克級的蛋白檢測。
超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒特別設計專(zhuān)為使用HRP偶聯(lián)的Western Blot實(shí)驗提供*的信號和低皮克靈敏度。其發(fā)光強度和好的的信號持續允許多次曝光，更容易收集到發(fā)文質(zhì)量的印記圖像。本品能兼容各種印跡膜、封閉液和大量的抗體稀釋液，能夠滿(mǎn)足絕大部分的Western blot應用需求。
超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒的檢測靈敏度和使用方法類(lèi)似于Thermo Scientific™的SuperSignal™ West Pico PLUS Chemiluminescent Substrate，具有以下*的特征：
低皮克級靈敏度：檢測NC膜或PVDF膜上低皮克級的蛋白條帶；
長(cháng)信號持續時(shí)間：在優(yōu)化條件下，經(jīng)底物孵育的印跡條帶能持續輸出6~8h的可檢測光信號；
試劑穩定性高：工作液在8h內穩定，試劑盒在4℃可穩定放置1年；
經(jīng)濟實(shí)惠：對稀釋抗體濃度進(jìn)行優(yōu)化
﹒0.2~1.0µg/ml一抗（從1µg/ml儲存液稀釋1:1,000~1:5,000倍）
﹒10~50ng/ml二抗（從1µg/ml儲存液稀釋1:20,000~1:100,000倍）
產(chǎn)品組成
組分編號 | 組分名稱(chēng) | 產(chǎn)品貨號（規格） | 儲存方法 | ||
100ML | 500ML | 1000ML | |||
MM0711-A | SuperSignal ECL A 液 | 50ml | 250ml | 2×250ml | 4℃避光保存 |
MM0711-B | SuperSignal ECL B 液 | 50ml | 250ml | 2×250ml | 4℃保存 |
注意事項
1） 為獲得醉加實(shí)驗效果，應注意優(yōu)化實(shí)驗條件，包括樣品用量、凝膠類(lèi)型、轉膜方法、膜的類(lèi)型、封閉液、洗滌液、一抗/二抗稀釋度以及孵育時(shí)間等。
2） 洗滌液、封閉液、抗體稀釋液、SuperSignal ECL工作液應足量使用，確保印跡膜處于濕潤狀態(tài)。
3） 為獲得醉加實(shí)驗效果，孵育過(guò)程中使用搖動(dòng)或擺動(dòng)工作臺。
4） 緩沖液中避免使用疊氮鈉作為防腐劑，因其會(huì )抑制HRP活性。
5） 使用親和素/系統時(shí)，應避免使用脫脂奶粉的封閉液。
6） SuperSignal ECL A液和B液在吸取過(guò)程中必須要更換槍頭，上述試劑相互污染后會(huì )導致SuperSignal ECL A液和B液逐漸失效，影響后續的使用效果。
7） SuperSignal ECL A液和B液使用后，請蓋緊瓶蓋以防失效， 特別是B液含有氧化劑，比較容易被還原而失效。
8） SuperSignal ECL熒光持續時(shí)間很長(cháng)，但開(kāi)始反應后的30min內熒光更強一些，隨后熒光會(huì )逐漸減弱，因此請注意充分利用這熒光較強的30min進(jìn)行曝光或成像儀檢測。
9） SuperSignal ECL工作液室溫能穩定保存8h，暴露在陽(yáng)光或其他強光下都會(huì )破壞工作液。短期暴露在實(shí)驗室光線(xiàn)下不會(huì )破壞工作液。
10） SuperSignal ECL A液和B液均對人體有害，操作時(shí)請注意適當防護。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
需要自行準備材料
Western Blot印跡膜：用合適方法電泳分離蛋白，并將這些蛋白轉移到所需的印跡膜上。
X光片或成像儀
旋轉或搖擺平臺振蕩器：孵育過(guò)程中用于膜的搖動(dòng)。
稀釋液、洗滌液、封閉液
一抗、HRP標記的二抗
用于X光片曝光用的暗盒、顯影和定影液
Western Blot操作步驟
【注意】：為獲得醉加實(shí)驗效果，應注意優(yōu)化整個(gè)實(shí)驗過(guò)程中的組分和步驟。
1） 將印跡膜從蛋白轉印儀中取出，加入合適的封閉液在室溫下孵育20~60min，保持振蕩，以封閉膜上非特異性蛋白結合位點(diǎn)。對于一些背景較高的抗體，可以在4℃封閉過(guò)夜。
2） 將印跡膜從封閉液中取出，加入一抗工作液中室溫或4℃孵育1h，保持振蕩。如果一抗孵育1h效果不佳，可在4℃孵育過(guò)夜，保持震蕩?；蚋鶕豢拐f(shuō)明選擇適當的孵育溫度和時(shí)間。
3） 將足量的洗滌液加入膜上，保證*覆蓋膜。振蕩孵育≥5min，更換洗滌液并重復該步4~6次。增加洗滌液體積、洗滌次數和洗滌時(shí)間有助于降低背景信號。
4） 將印跡膜加入HRP標記的二抗工作液中，室溫孵育1h，保持振蕩?；蚋鶕拐f(shuō)明選擇適當的孵育溫度和時(shí)間。
5） 重復步驟3），充分洗滌以去除未結合的HRP標記二抗。
6） 用鑷子將膜輕輕取出，用吸水紙略吸去過(guò)多的液體（勿接觸膜的蛋白面），然后置于一潔凈保鮮膜或恰當容器上。
7） 配制SuperSignal ECL工作液：根據需要量，取A液和B液等體積混合即為SuperSignal ECL工作液，室溫放置備用，工作液宜在臨檢前配制。
8） 根據膜的大小，按每10cm2膜加1ml SuperSignal ECL工作液的比例，滴加SuperSignal ECL工作液到膜上，確保工作液均勻覆蓋在膜上，孵育5min。
9） 從工作液中取膜，棄SuperSignal ECL工作液，用吸水紙略吸去過(guò)多的液體。將膜放在兩片保鮮膜中間（避免膜與膜之間產(chǎn)生氣泡），隨后進(jìn)行壓片檢測或成像儀檢測。
① 壓片檢測：a）將膜固定于膠片暗盒片夾內，蛋白面朝上，除適用于膠片曝光用的燈（如紅燈）之外，關(guān)閉所有的燈。b）將X光片置于膜的上面，建議一次曝光1min，立即顯影定影，根據結果再調整曝光時(shí)間，或直接分別曝光1，3，5min，然后一起顯影定影觀(guān)察結果。化學(xué)發(fā)光反應在底物孵育后的前5-30min是醉強烈的，這一反應可持續幾個(gè)小時(shí)，但強度會(huì )隨時(shí)間下降，如有底物孵育后較長(cháng)時(shí)間才曝光，曝光時(shí)間可能需要延長(cháng)以獲得較強信號。
11） 采用熒光成像儀檢測：將膜放置到熒光成像儀內，參考儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗室消耗品與實(shí)驗服務(wù)工作，主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒免疫學(xué)分析
超敏型ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒免疫學(xué)分析