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FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

簡(jiǎn)要描述:

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針FerroOrange是一種特異性檢測不穩定的鐵(II)離子(Fe2+)的熒光探針,定位在內質(zhì)網(wǎng)(ER)。一旦與Fe2+反應后,不可逆的生成一種橙色熒光產(chǎn)物(Absmax=542nm,FLmax=572nm,圖1. FerroOrange的光譜特征)。

產(chǎn)品時(shí)間:2024-05-16

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FerroOrange (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針


產(chǎn)品標簽

FeRhoNox-1;FerroOrange;Labile ferrous ion不穩定鐵(II)離子;Fe2+熒光探針;Ferroptosis鐵死亡;C11 BODIPY 581/591脂質(zhì)過(guò)氧化探針;


產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品編號               

規格                  

價(jià)格(元)         

FerroOrange (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針   

MX4559-24UG

24μg

2480

FerroOrange (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針

MX4559-48UG

2×24μg

4580


產(chǎn)品描述

FerroOrange是一種特異性檢測不穩定的鐵(II)離子(Fe2+)的熒光探針,定位在內質(zhì)網(wǎng)(ER)。一旦與Fe2+反應后,不可逆的生成一種橙色熒光產(chǎn)物(Absmax=542nm,FLmax=572nm,圖1. FerroOrange的光譜特征)。鐵(III)離子(Fe3+)或其它除鐵離子以外的二價(jià)金屬離子都不會(huì )使其熒光增強(見(jiàn)圖2. FerroOrange的反應特異性)。FerroOrange也不會(huì )與鐵蛋白和其它物質(zhì)中的螯合鐵反應。FerroOrange具強細胞膜滲透性和低細胞毒性(見(jiàn)附圖3. FerroOrange的細胞毒性測定),非常適用于活細胞成像。

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

圖1. FerroOrange的光譜特征。FerroOrange在0.05M HEPES buffer, pH 7.4內的吸收光譜(左)和熒光光譜。最大吸收波長(cháng)在542nm,最大熒光光譜在572nm。一旦與Fe2+反應,熒光強度顯著(zhù)增加。

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

圖2. FerroOrange的反應特異性。FerroOrange與各種金屬離子(左),活性氧或還原劑(右)的反應性。僅當與Fe2+反應,FerroOrange呈強熒光。


保存與運輸方法

保存:-20℃避光干燥保存,至少1年有效。

運輸:冰袋運輸。


注意事項

  1. FerroOrange主要定位在內質(zhì)網(wǎng)(見(jiàn)附圖4),但也可能檢測細胞質(zhì)池內的Fe2+,目前針對這一點(diǎn)未做明確評估。

  2. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

  3. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。


使用說(shuō)明

1. 需要自行準備的材料

1.1 細胞培養級DMSO(比如:MS4601A-100ML)

1.2 合適的清洗和觀(guān)察緩沖液(比如:PBS, pH 7.4;HBSS;無(wú)血清培養基等)。不要含酚紅。


2. 探針準備

2.1 從冰箱取出FerroOrange,置于室溫至少30min,將其置于微量離心機內低速離心。將瓶?jì)鹊姆勰╇x心到管底后,再開(kāi)蓋。

2.2 往一管FerroOrange(24μg)內加入35μl高質(zhì)量DMSO,用槍反復吹吸5次或以上,使其wan全溶解即得到1mMFerroOrange儲存液。若單次不能用完儲存液,請根據單次用量分裝,置于-20℃避光保存,一個(gè)月內使用。

2.3 于正式實(shí)驗前,用中性緩沖液或細胞培養基來(lái)稀釋1mM FerroOrange儲存液到所需工作濃度(比如:1μM),工作液需現配現用,盡快用完?!咀⒁猓核嵝匀芤簳?huì )氧化FerroOrange,嚴重影響探針的效率】。


3. 染色步驟

3.1于熒光培養皿中接種細胞,于37℃,5% CO2培養箱中孵育過(guò)夜。

3.2 染色步驟


4. 熒光檢測

對于熒光顯微鏡:通用的G激發(fā)濾片比如Cy3檢測用的濾片。

對于激光顯微鏡和流式細胞儀:532nm,514nm或561nm激光器用于激發(fā)。實(shí)在沒(méi)有,亦可用488nm激光器。發(fā)射波長(cháng)為572nm。


相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱(chēng)

規格                

MX5211-1MG      

C11 BODIPY 581/591 脂質(zhì)過(guò)氧化熒光探針

1mg

MX4558-50UG

FeRhoNox-1 (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針

50μg

MX4559-24UG

FerroOrange (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針

24μg

MX5401-1MG

MitoPerOx Mitochondrial Lipid Peroxidation Indicator 線(xiàn)粒體脂質(zhì)過(guò)氧化探針 

1mg

MX5402-1MG

BODIPY 558/568 C12脂質(zhì)轉運熒光探針

1mg


附錄 FerroOrange的細胞毒性

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

圖3.各種濃度FerroOrange對HepG2細胞的代謝活性。不同濃度的FerroOrange(以1% DMSO作為共溶劑)加入細胞內,培養24h后,用MTT法測定代謝活性。(n=3)

 

附錄FerroOrange的胞內定位

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

圖4.FerroOrange的胞內定位。將FerroOrange(紅色), ER Tracker(綠色)和Hoechist 3342(藍色)加載進(jìn)入HT-1080細胞并成像觀(guān)察。FerroOrange主要定位在內質(zhì)網(wǎng)。Bar:10 μm。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗室消耗品與實(shí)驗服務(wù)工作,主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。




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