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BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞

BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞

簡(jiǎn)要描述:

BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞菌株,是一種具較高重組活力的大腸桿菌菌株,提供了轉移載體和含腺病毒基因組載體之間發(fā)生重組事件必要的元件,是目前腺病毒系統常用的菌株之一。

產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-12

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BJ5183 Chemically Competent Cell

大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞

產(chǎn)品標簽

BJ5183;BJ5183-AD-1;pAdeasy-1;pAdeasy-2;腺病毒系統;


產(chǎn)品訂購:


貨號

產(chǎn)品名稱(chēng)

規格

價(jià)格(元)

MF2318-1000UL

BJ5183 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞

10×100μl

400

MF2318-5000UL

BJ5183 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞

50×100μl

1720

【好消息】:見(jiàn)我司的感受態(tài)細胞*活動(dòng)。買(mǎi)感受態(tài)細胞得京東卡,發(fā)表使用評論,贏(yíng)紅包,雙重驚喜,行動(dòng)起來(lái)啦。


產(chǎn)品組分:

組分編號

組分名稱(chēng)

貨號(規格)

MF2318-1000UL

MF2318-5000UL

MF2318-A

BJ5183 Chemically Competent Cell

10×100μl

50×100μl

MF2318-B

Control Vector puC19, 10pg/μl

10μl

10μl


菌株描述

BJ5183菌株是一種具較高重組活力的大腸桿菌菌株,提供了轉移載體和含腺病毒基因組載體之間發(fā)生重組事件必要的元件,是目前腺病毒系統常用的菌株之一。BJ5183菌株含recBC sbcBC雙重突變,賦予其較強的重組能力,有利于目的基因與腺病毒質(zhì)粒(pAdeasy-1或pAdeasy-2)的重組。另外,BJ5183菌株含endA突變(編碼核酸內切酶),這一突變賦予recBC sbcBC突變菌株更高的雙鏈斷裂修復活性,也有利于重組DNA的穩定和高純質(zhì)粒的提取。StrR賦予BJ5183菌株抗性。

BJ5183菌株基因型:endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (StrR)


產(chǎn)品描述

本品是大腸桿菌BJ5183菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細胞,可用于DNA的熱擊轉化。經(jīng)pUC19載體檢測轉化效率可達>5×108 cfu/μg DNA。且在-80能穩定保存幾個(gè)月轉化效率不發(fā)生改變。


保存與運輸條件:

保存:-80℃保存,個(gè)月有效。

運輸:干冰運輸。


注意事項

1) 感受態(tài)細胞必須用干冰運輸。感受態(tài)細胞應在-80℃保存(避免溫度波動(dòng)),不可反復凍融且放置時(shí)間過(guò)長(cháng),否則會(huì )減低感受態(tài)細胞的轉化效率。

2) 在冰上緩慢融化感受態(tài)細胞。不可在冰上放置時(shí)間過(guò)長(cháng),否則會(huì )降低轉化效率。

3) 進(jìn)行轉化操作時(shí),需在相應溫度及無(wú)菌條件下進(jìn)行。

4) 轉化高濃度的質(zhì)??上鄳獪p少終用于涂板的菌量。

5) 為防止轉化實(shí)驗不成功,可保留部分連接反應液以重新轉化,將損失降到低。

6) 產(chǎn)品包裝內含載體pUC19 DNA(10pg/μl),供對照實(shí)驗用。

7) BJ5183菌株的質(zhì)粒產(chǎn)量不高。腺病毒構建成功后,可選擇在其它大腸桿菌菌株中擴繁和純化質(zhì)粒。

8) 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

使用方法【所有操作均在無(wú)菌條件的標準下進(jìn)行】

1) 從-80冰箱取出取感受態(tài)細胞,迅速置于冰浴中,5min后待菌塊融化,加入目的質(zhì)粒含有目的基因并且是線(xiàn)性化和腺病毒質(zhì)粒,用手輕彈管底輕輕混勻(避免用槍吹打),冰浴靜置25min。

2) 42水浴熱45s,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2min。此過(guò)程不要搖動(dòng)離心管。

3) 向每個(gè)離心管中加入700 μl無(wú)菌的2YT或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37 搖床,200 rpm振蕩培養60min,目的使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標記基因表達,使菌體復蘇。

低速離心收菌(比如5000rpm,1min),留取100μl左右上清,用槍輕輕吹打重懸菌塊,之后加到含相應抗生素2YT或LB固體瓊脂培養基上,用無(wú)菌的涂布棒將細胞均勻涂開(kāi),將平板置于室溫(或37)直至液體被吸收,之后倒置放于37過(guò)夜培養。

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貨號

名稱(chēng)

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10×100μl

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10×100μl

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10×100μl

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10×100μl

MS0021-10G

Chloramphenicol, USP Grade 

10g

MS0018-10G

Ampicillin, Sodium Salt 氨芐鈉

10g

MS0017-5G

Carbenicillin, Disodium Salt 羧芐二鈉鹽

5g

MS0019-10G

Kanamycin Sulfate 硫酸

10g

MS0014-1G

Rifampicin, USP Grade 

1g

MF2001-1G

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

1g

MF2002-1G

IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

1g



— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】


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BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞

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