BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞
簡(jiǎn)要描述:
BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞菌株,是一種具較高重組活力的大腸桿菌菌株,提供了轉移載體和含腺病毒基因組載體之間發(fā)生重組事件必要的元件,是目前腺病毒系統常用的菌株之一。
產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-12
BJ5183 Chemically Competent Cell
大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞
產(chǎn)品標簽:
BJ5183;BJ5183-AD-1;pAdeasy-1;pAdeasy-2;腺病毒系統;
產(chǎn)品訂購:
貨號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 價(jià)格(元) |
MF2318-1000UL | BJ5183 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞 | 10×100μl | 400 |
MF2318-5000UL | BJ5183 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞 | 50×100μl | 1720 |
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產(chǎn)品組分:
組分編號 | 組分名稱(chēng) | 貨號(規格) | |
MF2318-1000UL | MF2318-5000UL | ||
MF2318-A | BJ5183 Chemically Competent Cell | 10×100μl | 50×100μl |
MF2318-B | Control Vector puC19, 10pg/μl | 10μl | 10μl |
菌株描述
BJ5183菌株是一種具較高重組活力的大腸桿菌菌株,提供了轉移載體和含腺病毒基因組載體之間發(fā)生重組事件必要的元件,是目前腺病毒系統常用的菌株之一。BJ5183菌株含recBC sbcBC雙重突變,賦予其較強的重組能力,有利于目的基因與腺病毒質(zhì)粒(pAdeasy-1或pAdeasy-2)的重組。另外,BJ5183菌株含endA突變(編碼核酸內切酶),這一突變賦予recBC sbcBC突變菌株更高的雙鏈斷裂修復活性,也有利于重組DNA的穩定和高純質(zhì)粒的提取。StrR賦予BJ5183菌株抗性。
BJ5183菌株基因型:endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (StrR)
產(chǎn)品描述
本品是大腸桿菌BJ5183菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細胞,可用于DNA的熱擊轉化。經(jīng)pUC19載體檢測轉化效率可達>5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩定保存幾個(gè)月轉化效率不發(fā)生改變。
保存與運輸條件:
保存:-80℃保存,六個(gè)月有效。
運輸:干冰運輸。
注意事項
1) 感受態(tài)細胞必須用干冰運輸。感受態(tài)細胞應在-80℃保存(避免溫度波動(dòng)),不可反復凍融且放置時(shí)間過(guò)長(cháng),否則會(huì )減低感受態(tài)細胞的轉化效率。
2) 好在冰上緩慢融化感受態(tài)細胞。不可在冰上放置時(shí)間過(guò)長(cháng),否則會(huì )降低轉化效率。
3) 進(jìn)行轉化操作時(shí),需在相應溫度及無(wú)菌條件下進(jìn)行。
4) 轉化高濃度的質(zhì)??上鄳獪p少終用于涂板的菌量。
5) 為防止轉化實(shí)驗不成功,可保留部分連接反應液以重新轉化,將損失降到低。
6) 產(chǎn)品包裝內含載體pUC19 DNA(10pg/μl),供對照實(shí)驗用。
7) BJ5183菌株的質(zhì)粒產(chǎn)量不高。腺病毒構建成功后,可選擇在其它大腸桿菌菌株中擴繁和純化質(zhì)粒。
8) 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在無(wú)菌條件的標準下進(jìn)行】
1) 從-80℃冰箱取出取感受態(tài)細胞,迅速置于冰浴中,5min后待菌塊融化,加入目的質(zhì)粒(含有目的基因并且是線(xiàn)性化)和腺病毒質(zhì)粒,用手輕彈管底輕輕混勻(避免用槍吹打),冰浴靜置25min。
2) 42℃水浴熱激45s,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2min。此過(guò)程不要搖動(dòng)離心管。
3) 向每個(gè)離心管中加入700 μl無(wú)菌的2YT或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃ 搖床,200 rpm振蕩培養60min,目的使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標記基因表達,使菌體復蘇。
低速離心收菌(比如5000rpm,1min),留取100μl左右上清,用槍輕輕吹打重懸菌塊,之后加到含相應抗生素的2YT或LB固體瓊脂培養基上,用無(wú)菌的涂布棒將細胞均勻涂開(kāi),將平板置于室溫(或37℃)直至液體被吸收,之后倒置放于37℃過(guò)夜培養。
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MS0021-10G | Chloramphenicol, USP Grade | 10g |
MS0018-10G | Ampicillin, Sodium Salt 氨芐鈉 | 10g |
MS0017-5G | Carbenicillin, Disodium Salt 羧芐二鈉鹽 | 5g |
MS0019-10G | Kanamycin Sulfate 硫酸 | 10g |
MS0014-1G | Rifampicin, USP Grade | 1g |
MF2001-1G | X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 | 1g |
MF2002-1G | IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 1g |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗室消耗品與實(shí)驗服務(wù)工作,主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞
BJ5183大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞