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一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)細胞染色

一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)細胞染色

簡(jiǎn)要描述:

一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)細胞染色是一種活性基,在許多關(guān)鍵生理功能中發(fā)揮重要作用。一氧化氮,一氧化氮合酶(NOS)催化精氨suan的氧化產(chǎn)物,參與宿主防御和發(fā)育、調節蛋白活化、以及與功能生物分子之間的直接共價(jià)相互作用。

產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-12

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Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit

一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)

產(chǎn)品標簽

Nitric Oxide (NO) 一氧化氮;NO含量檢測;分光光度計檢測;Griess reagent;Carboxy-PTIO 一氧化氮清除劑;DAF-FM DA;

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品編號

規格

價(jià)格(元)

Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit

一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)

MX4731-500T

500T

729

產(chǎn)品描述

一氧化氮(Nitric Oxide, NO)是一種活性基,在許多關(guān)鍵生理功能中發(fā)揮重要作用。一氧化氮,一氧化氮合酶(NOS)催化jing氨suan的氧化產(chǎn)物,參與宿主防御和發(fā)育、調節蛋白活化、以及與功能生物分子之間的直接共價(jià)相互作用。一氧化氮生成后迅速代謝生成亞硝酸鹽(Nitrite)和硝酸鹽(Nitrate),兩種首要的、穩定的和非揮發(fā)性的裂解產(chǎn)物,通過(guò)對這兩種產(chǎn)物的測定能間接反映樣本內的一氧化氮水平。

一氧化氮檢測試劑盒(Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit)利用經(jīng)典的Griess reagent,對亞硝酸鹽進(jìn)行定量測定。本試劑盒以亞硝suan鈉為標準品,通過(guò)優(yōu)化檢測體系,檢測下限達1μM,且在1~100μM范圍內具有好的的線(xiàn)性關(guān)系。本試劑盒不僅能檢測細胞、組織或培養液中的一氧化氮含量,還能檢測血清、血漿或尿液中的一氧化氮含量。

產(chǎn)品組成

組分編號

組分名稱(chēng)

規格

保存方式

MX4731-A

1M NaNO2

1ml

2-8避光保存

MX4731-B

Griess Reagent I

25mL

2-8避光保存

MX4731-C

Griess Reagent II

25mL

2-8避光保存

保存與運輸方法

保存:2-8避光保存,至少4個(gè)月穩定。

運輸:冰袋運輸。

保存與運輸方法

保存:-20℃干燥保存,至少1年有效。

運輸:冰袋運輸。

注意事項

  • 本試劑盒內的組分若保存不當發(fā)生顏色變化或沉淀,說(shuō)明溶液已經(jīng)失效,請勿再用。

  • 當檢測細胞或組織一氧化氮含量,不建議使用RIPA裂解液,因其可能在后續實(shí)驗中產(chǎn)生沉淀,影響測試。建議使用免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑)(貨號:MP1508-100ML)。

  • 本試劑盒僅測定的是亞硝酸鹽含量,不能檢測硝酸鹽,反映的并非總一氧化氮含量,只能在很大程度上反映一氧化氮的相對量,適合不需要精確定量的實(shí)驗。若需要測定總一氧化氮含量,請選擇總一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)(貨號:MX4732-50T),此試劑盒利用硝酸鹽還原酶將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,然后利用Griess reagent測定亞硝酸鹽,進(jìn)而反映總一氧化氮水平。

  • 本試劑盒對人體有害,請注意適當防護,避免直接接觸人體或吸入體內。

  • 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

操作步驟

【注意】本試劑盒可用于培養液中的一氧化氮測定,培養液內的酚紅和10%血清對測定無(wú)明顯干擾。

【注意】本試劑盒可用于血清中的一氧化氮測定。當只需粗略計算,可直接用水稀釋標準品,從而計算出血樣中一氧化氮含量。當需精確計算,如果待測的正常血清是常見(jiàn)血清,能從文獻查閱到一氧化氮濃度,那么用此已經(jīng)一氧化氮濃度的正常血清稀釋標準品,這樣能得到比較精確的一氧化氮濃度?;蚴褂靡阎獫舛鹊娜嘶蚱渌麆?dòng)物血清來(lái)稀釋標準品也可達到目的?;騾⒖嘉墨I進(jìn)行血清中一氧化氮濃度的測定。

【注意】樣品中存在的一些內在成分可能會(huì )干擾測定,導致OD值和靈敏度降低。干擾程度依次順序:尿液>血清>血漿>培養基。

  • 需要設備

96孔酶標儀或可見(jiàn)光分光光度計,加波長(cháng)540nm,或在520~560nm下測定,靈敏度可能會(huì )降低。

  • 準備步驟

2.1 實(shí)驗前將試劑從冰箱取出回溫至室溫。

2.2 標準品準備:每次測量均新做標準曲線(xiàn),用待測樣品所用溶液來(lái)稀釋標準品,使得濃度在1~100μM內。

比如:當樣品為細胞培養液上清,細胞培養液為DMEM+10% FBS,則用DMEM+10% FBS稀釋標準品。標準品的濃度通??扇?,1,2,5,10,20,40,60,80,100μM。

2.3 樣品準備:a)當樣品為培養液上清,可直接取樣。如果存在沉淀物,則需離心后取上清;b)當樣品為組織或細胞,可快速凍融裂解,然后離心沉淀取上清,體積不足50μl,可用雙蒸水、超純水或0.9% NaCl稀釋?zhuān)ㄏ鄳臉藴势芬残栌秒p蒸水、超純水或0.9% NaCl稀釋?zhuān)?。細胞或組織也可用免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑)來(lái)裂解,同樣的,標準品需用裂解液稀釋。

三、測定步驟

3.1 取50μl標準品或樣品,加入96孔板內,做好標記;

3.2 每孔加入提前回至室溫的50μl Griess reagent I;

3.3 每孔加入提前回至室溫的50μl Griess reagent II;

3.4 室溫避光孵育5min;

3.5 在540nm(或520~560nm)測定吸光度。需在30min內測完,以防褪色降低靈敏度。

3.6 以標準品濃度為橫坐標,吸光度OD值為縱坐標繪制標準曲線(xiàn),獲得橫縱坐標之間的函數關(guān)系式。之后將樣品OD值代入公式來(lái)計算一氧化氮濃度。

相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱(chēng)

規格

MP1508-100ML

免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑)

100ml

MX4731-500T

Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit 一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)

500T

MX4732-50T

Total Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit 總一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)

50T

MX4701-10MG

Carboxy-PTIO 一氧化氮(NO)清除劑

10mg

MX4702-100T

DAF-FM DA (5mM in DMSO) 一氧化氮(NO)熒光探針

100T

MX4712-25G

Sodium Nitroprusside (SNP) Dihydrate 硝pu鈉二水合物

25g

MX4713-10MG

S-Nitrosoglutathione (GSNO) 亞硝基谷胱gan肽

10mg

MX4714-100MG

2,3-Diaminonaphthalene (DAN), Suitable for fluorescence 2,3-二氨基萘

100mg

MX4715-100MG

1,2-Diaminoanthraquinone (DAA, DAQ) 1,2-二氨基蒽醌

100mg


— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】



上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗室消耗品與實(shí)驗服務(wù)工作,主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。


一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)細胞染色

一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)細胞染色


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