PKH26 Cell Linker Kit 細胞連接試劑盒
簡(jiǎn)要描述:
PKH26 Cell Linker Kit 細胞連接試劑盒:(PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling)是一款基于熒光探針PKH26,用于常規細胞膜標記的檢測試劑盒,適用于體外細胞標記,體外細胞增殖以及長(cháng)期的體內細胞跟蹤研究等。
產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-21
PKH26細胞連接試劑盒(用于常規細胞膜標記)
產(chǎn)品關(guān)鍵詞:
PKH26;Calcein AM 鈣黃綠素;PKH67;CFDA SE;In vivo cell tracking 體內細胞示蹤;Sigma MINI26;Phanos Technologies;
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號 | 規格 | 儲存條件 |
PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling PKH26細胞連接試劑盒(用于常規細胞膜標記) | MX4021-100UL | 100μl | 2-8ºC避光保存 |
MX4021-200UL | 200μl | 2-8ºC避光保存 | |
MX4021-500UL | 500μl | 2-8ºC避光保存 |
產(chǎn)品描述
PKH26細胞連接試劑盒(用于常規細胞膜標記)(PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling)是一款基于熒光探針PKH26,用于常規細胞膜標記的檢測試劑盒,適用于體外細胞標記,體外細胞增殖以及長(cháng)期的體內細胞跟蹤研究等。
PKH26是一種的膜標記探針,結構上帶有一長(cháng)脂肪族尾巴,能穩定插入細胞膜脂質(zhì)區域。PKH26熒光處于黃-橙色光譜區間(見(jiàn)圖1),大激發(fā)波長(cháng)為551nm,大發(fā)射波長(cháng)是567nm,與羅丹明或PE檢測系統兼容。也可能用標準熒光素(Fluorescein)激發(fā)濾片,但熒光強度可能會(huì )有些降低。PKH26具長(cháng)的體內半衰期,超過(guò)100天,非常適用于體內細胞示蹤、細胞增殖研究和其他長(cháng)期實(shí)驗。
稀釋液C(Diluent C)是本試劑盒配套提供的一種水溶性溶液,特別設計的一種標記媒介能維持細胞活力,同時(shí)大化染料溶解性和標記過(guò)程中的染色效率。Diluent C對哺乳動(dòng)物細胞來(lái)說(shuō)是等滲的,不含去污劑或有機溶劑,也不含生理鹽和緩沖劑。根據細胞類(lèi)型,染料標記后膜的內在化程度,標記細胞可能呈現不同的狀態(tài),從明亮,到均勻點(diǎn)狀或斑駁狀。然而,PKH26熒光在生理范圍內不依賴(lài)于pH,且每個(gè)細胞的熒光強度通常不受染料位置的影響。
圖1. PKH26的激發(fā)和發(fā)射光譜圖
我司(懋康生物)提供三種規格的PKH26細胞連接試劑盒(用于常規細胞膜標記),其中:
Mini Kit(CAT#:MX4021-100UL)建議用于小量或初步研究。當使用2ml染色體積(含2μM 終濃度的PKH26),本試劑盒含有足量的染料用于檢測25次細胞樣本(2×107個(gè)細胞/次),和足量的Diluent C用于5次細胞樣本(2×107個(gè)細胞/次)。用戶(hù)需根據細胞類(lèi)型和實(shí)驗目的來(lái)優(yōu)化確定加的染料濃度。
Midi Kit(CAT#:MX4021-200UL)適用于中量研究。當使用2ml染色體積(含2μM 終濃度的PKH26),本試劑盒含有足量的染料用于檢測50次細胞樣本(2×107個(gè)細胞/次),和足量的Diluent C用于30次細胞樣本(2×107個(gè)細胞/次)。用戶(hù)需根據細胞類(lèi)型和實(shí)驗目的來(lái)優(yōu)化確定加的染料濃度。
Maxi Kit(CAT#:MX4021-500UL)適用于大量或體內研究。當使用2ml染色體積(含2μM 終濃度的PKH26),本試劑盒含有足量的染料用于檢測125次細胞樣本(2×107個(gè)細胞/次),和足量的Diluent C用于30次細胞樣本(2×107個(gè)細胞/次)。用戶(hù)需根據細胞類(lèi)型和實(shí)驗目的來(lái)優(yōu)化確定加的染料濃度
產(chǎn)品包裝
組分 | 名稱(chēng) | 貨號(規格) | ||
MX4021-100UL | MX4021-200UL | MX4021-500UL | ||
MX4021-A | PKH26 Dye (1×10-3 M in EtOH) | 1×100μl | 2×100μl | 5×100μl |
MX4021-B | Diluent C | 1×10ml | 2×30ml | 2×30ml |
注意事項
1) PKH26是以溶于乙醇的儲存液形式提供,保存的過(guò)程中需避光并擰緊蓋子,以防止溶液揮發(fā)引起的染料濃度提高。使用前需檢查是否有結晶,若有結晶,需在37℃水浴溶晶,超聲或渦旋直至*溶解。
2) Diluent C使用前需置于室溫回溫之后再配制標記用的細胞和染料工作液。Diluent C是無(wú)菌溶液,不含任何防腐劑或抗生素,使用和保存過(guò)程中都注意無(wú)菌。
3) PKH26不能保存在Diluent C內,保存在Diluent C的染色工作液需在使用前配制,現配現用。
4) 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,操作和儲存過(guò)程中需注意避光,以減緩熒光淬滅。
5) 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
操作步驟
一、 自行準備儀器和試劑(試劑盒不提供,用于常規細胞膜標記)
二、 常規細胞膜標記
【注意事項】:
1) 通過(guò)分配脂質(zhì)染料進(jìn)入細胞膜來(lái)進(jìn)行標記。標記強度是染料濃度和細胞濃度共同作用的一種功能,且不會(huì )飽和。因此,用來(lái)標記的染料濃度需要有限,過(guò)度標記細胞會(huì )引起細胞膜完整性喪失和降低的細胞復原能力。
2) 以下步驟適用于體外或離體標記干細胞、淋巴細胞、單個(gè)核細胞、內皮細胞、神經(jīng)元或任何需要將染料插入細胞膜脂質(zhì)區的其他細胞類(lèi)型。而體內標記、血小板標記,或在含非吞噬細胞的群體內選擇性標記吞噬細胞,需對步驟做適當修改。
3) 需在單克隆抗體染色前進(jìn)行常規細胞膜染色。4℃單克隆抗體染色過(guò)程中膜染料仍能維持穩定。然而,如果單抗標記后再室溫下進(jìn)行常規細胞膜染色,極有可能引起單抗的“蓋帽”發(fā)生。
4) 以下步驟中用到的細胞和染料濃度是推薦用的起始濃度,廣譜適用于各種細胞類(lèi)型。用戶(hù)需根據自身細胞類(lèi)型和實(shí)驗目的確定加的染料和細胞濃度,通過(guò)對染色后細胞活力(比如典化丙啶排斥),熒光強度,染色均勻性和對待研究細胞功能無(wú)影響等方面來(lái)綜合評估。
5) PKH26染色過(guò)程中需避免疊氮化物或代謝毒物的存在。
6) 雖然粘附在固相基質(zhì)上的貼壁細胞可能被標記,使用單細胞懸浮液能得到更勻質(zhì)的染色結果。染色前使用蛋白消化酶比如胰酶/EDTA處理貼壁或結合細胞制備成分散的單細胞懸液能得到hao的染色結果。
【染色流程】:
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MX4021-100UL | PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling PKH26細胞連接試劑盒(用于常規細胞膜標記) | 100μl |
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MX4002-10MG | DiI (DiIC18(3)) 細胞膜橙紅色熒光探針 | 10mg |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗室消耗品與實(shí)驗服務(wù)工作,主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
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