EHA101農桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞?
簡(jiǎn)要描述：
EHA101農桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞?: EHA101菌株的染色體背景為C58，核基因含li福平抗性基因rif，為了便于轉化操作，此菌株攜帶一無(wú)自身轉運功能的胭脂堿型Ti質(zhì)粒pEHA101（pTiBo542DT-DNA），此質(zhì)粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件。
產(chǎn)品時(shí)間：2024-03-25
打印當前頁(yè)EHA101 Chemically Competent Cell 農桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞
產(chǎn)品標簽：
EHA101菌株；農桿菌感受態(tài)細胞；Rifampicin（Rif） li福平；Kanamycin（kan）卡那mei素； EHA105；LBA4404；GV3101；AGL1；植物轉基因研究；
產(chǎn)品訂購：
貨號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 價(jià)格（元） |
MF2301-1000UL | EHA101 Chemically Competent Cell 農桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞 | 10×100μl | 280 |
MF2301-5000UL | EHA101 Chemically Competent Cell 農桿菌化學(xué)感受態(tài)細胞 | 50×100μl | 1220 |
【好消息】：見(jiàn)我司的感受態(tài)細胞*活動(dòng)。買(mǎi)感受態(tài)細胞得京東卡，發(fā)表使用評論，贏(yíng)紅包，雙重驚喜，行動(dòng)起來(lái)啦。
產(chǎn)品描述：
EHA101菌株的染色體背景為C58，核基因含li福平抗性基因rif，為了便于轉化操作，此菌株攜帶一無(wú)自身轉運功能的胭脂堿型Ti質(zhì)粒pEHA101（pTiBo542DT-DNA），此質(zhì)粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件，pEHA101（pTiBo542DT-DNA）質(zhì)粒自身的T-DNA轉移功能雖被破壞，但可以幫助轉入的雙元載體T-DNA順利轉移）。pEHA101（pTiBo542DT-DNA）質(zhì)粒攜帶篩選標簽kan，賦予EHA101菌株卡那mei素抗性，適用于玉米、水稻、煙草等植物的轉基因操作。
我司提供的EHA101化學(xué)轉化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，基因型為C58 (rifR) Ti pEHA101 (pTiBo542D T- DNA) (kanR) Nopaline，經(jīng)pK7WGF2質(zhì)粒（壯觀(guān)mei素抗性）檢測轉化效率>104 cfu/μg DNA。
根癌農桿菌介導的轉化原理：
根癌農桿菌能在自然條件下趨化性的感染大多數雙子葉植物或裸子植物的受傷部位，誘導產(chǎn)生冠癭瘤。誘發(fā)冠癭瘤的原因在于根癌農桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA含8個(gè)左右的基因能在植物細胞內表達，指導合成一種非常特殊的化合物冠癭堿，進(jìn)而引發(fā)轉化細胞癌變；根癌農桿菌Ti質(zhì)粒（150～200kb）上的一段T-DNA，隨著(zhù)農桿菌侵染植物傷口進(jìn)入細胞后，T-DNA脫離質(zhì)粒并整合到植物基因組。因此，將外源基因插入到改造的T-DNA中，借助農桿菌的感染作用，從而達到將外源基因轉化并整合進(jìn)入受體植物的目的。
Ti質(zhì)粒的類(lèi)型：
根據根癌農桿菌誘導的植物冠癭瘤中所合成的冠癭堿種類(lèi)不同，Ti質(zhì)?？煞譃?/span>4種類(lèi)型：章魚(yú)堿型(octopine)、胭脂堿型(nopaline)、農桿堿型(agropine)、農桿菌素堿型(agrocinopine)或稱(chēng)為琥珀堿型(succinamopine)。章魚(yú)堿和胭脂堿是由氨基酸衍生的冠癭堿，而農桿堿和農桿菌素堿是屬于單糖衍生的冠癭堿。各種不同類(lèi)型的Ti質(zhì)粒都具有控制腫瘤誘發(fā)的且物理位置彼此相鄰的T-DNA區和毒性區(Vir區)，它們約占Ti質(zhì)粒DNA總長(cháng)度的1/3。
產(chǎn)品組分：
組分編號 | 組分名稱(chēng) | 規格 | 儲存方法 |
MF2301-A | EHA101 Chemically Competent Cell | 10×100μl | -80oC保存 |
MF2301-B | pK7WGF2 Control Vector (10ng/μl) | 10μl | -80oC保存 |
注意事項
9） 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1) 取-80℃保存的感受態(tài)細胞于室溫或手心片刻待其部分融化，達到冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰浴中使其*融化。
2) 往100μl感受態(tài)細胞懸液中加入1μg（體積不大于10μl）目的DNA，用手管底使其混勻，依次于冰上靜置5min，液氮5min，37℃水浴5min，冰浴5min。
3) 加入700μl無(wú)抗生素的LB或YEB液體培養基，于28℃振蕩培養2-3h。
4) 6,000rpm離心1min，吸掉600ul上清，之后用槍輕輕吹打重懸菌體。之后加到含相應抗生素的LB或YEB平板上，用無(wú)菌玻棒輕輕的將細胞均勻涂開(kāi)。室溫正置10 min，待液體被吸收后，倒置平板，28℃培養2-3天。
【注意】：當平板只含轉化所用雙元載體抗生素時(shí)，28℃培養48h即可；當平板中加入雙元載體抗生素的同時(shí)，再加入20μg/ml li福平時(shí)，需28℃培養60h；若使用的平板含50μg/ml li福平，需在28℃培養72-90h。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗室消耗品與實(shí)驗服務(wù)工作，主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
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