CCK-8 細胞增殖及毒性檢測的步驟詳細說(shuō)明
1. 向各孔中加入100 μl細胞懸液。a)
2. 在37℃下預孵育培養板。b)
3. 向各孔中加入各濃度的待測溶液c)10 μl。
4. 37℃下孵育。
5. 向各孔中加入10 μl的CCK-8溶液d)。
6. 37℃下孵育1-4小時(shí)。e)
7. 測定450 nm處的OD值。
a) 使用適當的培養基制備50,000-100,000個(gè)/ml的細胞懸液。
b) 建議使用CO2培養箱guo夜預培養。
c) 使用培養基或PBS來(lái)制備溶液。
d) 如果待測溶液有還原性，測定不含細胞，但含有CCK-8的待測溶液在450 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入CCK-8 ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養基，并用培養基洗滌細胞兩次，然后加入新的100 μl培養基和10 μl CCK-8進(jìn)行檢測。
e) 白細胞可能需要培養較長(cháng)時(shí)間。